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一种热休克蛋白可使PCR灵敏度提高10倍
【字体: 大 中 小 】 时间:2003年07月07日 来源:
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[生物通讯]美国马里兰州大学生物技术研究所的研究人员称,为海底热泉中的细菌提供保护的一种独特的热休克蛋白可用来提高PCR的灵敏度。PCR即聚合酶链式反应,是扩增DNA片段的一项常规技术,为分子生物学带来了一场革命。
PCR现已广泛用于医疗和法医鉴定。另外,通过整合这种独特的热休克蛋白到细菌细胞中,可以大大提高疫苗、抗体以及其它重要医用蛋白的商业化生产的效率。未来,这种蛋白的应用还将影响到农业、渔业生产以及其它重要的经济生物过程。
深海热泉中的水温超过正常沸点,生活在那里的微生物都拥有抵御热损伤的能力,马里兰州大学生物技术研究所海洋生物技术中心的Frank Robb介绍说。当温度升至103℃ 时,海底微生物就会形成热休克蛋白作为细胞内关键蛋白的陪护,起着保护并允许这些关键蛋白在高温下保持完好无损的作用。
类似的陪伴蛋白存在于所有的生命分支中。在人类中,这些陪伴蛋白通过防止瞳孔中的液体腐坏协助预防白内障。已普遍用于临床医学、法医学、进化生物学、考古学以及遗传病诊断的PCR技术依赖的正是热稳定的DNA聚合酶。
Robb解释了他的研究小组最近的实验:“我们已能够证明,通过补充一种从激烈火球菌(Pyrococcus
furiosus)中提取的小热休克蛋白到用于PCR检测的DNA聚合酶中,可将PCR检测的灵敏度提高10倍。
另外,当研究人员将编码这些独特陪伴蛋白的基因导入大肠杆菌中时,这些改造的大肠杆菌能够在高温下生长并存活,Robb介绍说。
这项研究发表在《极端环境微生物》(extremophiles)上,作者为Laksanalamai P, Jiemjit A, Bu Z, Maeder L, Robb FT 。文章题目为:Multi-subunit assembly of the Pyrococcus furiosus small heat shock protein is essential for cellular protection at high temperature。
马里兰州大学生物技术研究所已为这种小热休克蛋白申请了专利。预知更多技术授权方面的信息,请联系该所业务拓展部副总裁Claude Nash,nash@umbi.umd.edu or 410-385-6328。(生物通编译)