新实时PCR流感检测技术通过FDA审核

【字体: 时间:2008年01月08日 来源:生物通

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  美国FDA(食品与药品监督管理局)日前核准Prodesse公司推广它们的以实时PCR为基础的流感检测技术。

  

生物通报道:美国FDA(食品与药品监督管理局)日前核准Prodesse公司推广它们的以实时PCR为基础的流感检测技术。

 

该公司的ProFlu分析专门设计用于同时检测和区分A型流感病毒、B型流感病毒和呼吸道病毒,并且能够在大约三个小时内给出结果。

 

Prodesse公司表示,目前他们还在研制其他检测技术,包括对人类间质肺炎病毒(metapneumovirus)的检测方法。在临床上需要对这种病毒与副流感病毒进行区分,并且即将开始临床试验。

 

FDA在宣布同意推广Luminex公司的一种呼吸道病毒分析面板的同一周内宣布了这项消息。

 

Luminex公司的xTag呼吸道病毒面板(xTag Respiratory viral Panel)基于改公司的xMAP珠技术并且能够靶向12种病毒,而这12种病毒则能导致85%的呼吸道病毒感染(包括不同的流感病毒株)。

 

Prodesse宣布,它们的实时PCR检测具有多种优势,例如能够减少传递时间、消除扩增子载体污染和比其他分子诊断技术(包括微珠和芯片)相对较低的装备成本。

 

2001,年荷兰的病毒学者van den Hoogen首先发现人类间质肺炎病毒。最初他是从28个保存了超过20年的人类鼻咽检体中分离出此病毒。此病毒由来已久,会到最近才被发现,是因为在传统细胞培养过程中,病毒生长速度极为缓慢,不易培养诊断。人类间质肺炎病毒是RNA病毒,属于副黏液病毒属(paramyxmoviridae)

 

副黏液病毒属包括数种最重要的呼吸道感染病毒:副流行性感冒病毒(parainfluenza virus)、呼吸道融合病毒(respiratory syncytial virus; RSV),及两种常见的儿童接触性传染病腮腺炎(mumps)及麻疹(measles)。副黏液病毒属下又可细分genus pneumovirus,包括呼吸道融合病毒及间质肺炎病毒。以往间质肺炎病毒只在鸟类中发现,现在则知道它也可以感染人类。间质肺炎病毒共有3种基因型(genotypes)AB感染人类,C只在鸟类中
发现。

 

感染人类的称为人类间质肺炎病毒(human metapneumovirus; hMPV),感染鸟类的称为鸟间质肺炎病毒(avian metapneumovirus; aMPV)。鸟间质肺炎病毒在1970年代就已经发现,并爆发多次家禽群聚感染死亡的案例。人类间质肺炎病毒则在2001年发现,同时van den Hoogen等回溯血清抗体的研究,在1958年的72个血清检体中,年龄899岁,抗体阳性反应比例100%,显示该病毒在人类之间互相传染已经有很长的时间,只是以前没有发现罢了。

 

人类间质肺炎病毒是线性负股RNA病毒,长度约13,000个核甘酸。3'端至5'端基因结构依序为nucleoprotein (N)phosphoprotein (P)matr-ix protein (M)fusion protein (F)putative 22k protein (M2)small hydrophobic protein (SH)attachment glycoprotein (G)large polymerase protein (L)。和鸟间质肺炎病毒比较,最前端缺乏NS1NS2基因,其它段排列顺序也不全相同。由NPMFM2-1M2-2的胺基酸序列比较,人类间质肺炎病毒和鸟间质肺炎病毒的相似性约56%-88%

 

人类间质肺炎病毒外型为多型性(polymorphic),有蛋白质外壳(surface glycoprotein),平均直径约200nm。只会感染人类,而缺乏感染禽鸟类的能力。病毒培养可在猴肾细胞(tertiary monkey kidney cells)HEp-2MK-2Vero cells生长,速度缓慢。无法在狗肾细胞(Madin-Darby canine kidney cells)或鸡胚生长。病毒培养2-3周后,以显微镜观察细胞病变效应(cytopathic effect; CPE)会发现有细胞融合现象(cells syncytial formation),型态和呼吸道融合病毒类似,无法区别。

 

人类间质肺炎病毒,临床上的表现类似呼吸道融合病毒(respiratory syncytial virus; RSV),会导致上呼吸道及下呼吸道的感染,并会在婴幼儿、免疫功能低下、及慢性疾病的病人造成较严重的感染,甚至呼吸衰竭。咳嗽及鼻塞是最常见的临床症状。初次感染的年龄大部分报告在五岁以前,而且所有年纪的人均可以反复感染,但症状通常轻微。诊断有反转录聚合酉每连锁反应(reverse transcription PCR)、血清抗体上升、病毒培养等方式,但尚无商业化检验方法上市。治疗上以支持性疗法为主,无特殊抗病毒药物或免疫球蛋白可使用。(生物通雪花)

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