中国学者J. Virol解析杆状病毒核心基因ha72

【字体: 时间:2013年12月12日 来源:中科院

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  中科院武汉病毒研究所系统病毒学研究组在杆状病毒ODV特异性囊膜蛋白HA72的功能研究方面取得重要进展。

  

   近期,中科院武汉病毒研究所系统病毒学研究组在杆状病毒ODV特异性囊膜蛋白HA72的功能研究方面取得重要进展。相关结果发表在国际病毒学杂志Journal of Virology上。

  杆状病毒包含37个核心基因,它们在病毒生活史中发挥着重要的作用。其中棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpaarmigera NPV)编码的ORF72 (ac78的同源基因) 是新鉴定的未知功能的核心基因。在该研究中,通过转录和表达时相分析发现ha72为晚期基因,而其表达产物亚细胞定位于核膜环带区。

   生物信息学分析发现,HA72包含一个高度保守的N端的IPLKL motif和一个保守的fumaratereductaseflavoprotein C-terminal motif,后者报道在氧化还原反应中发挥功能。Ha72基因的缺失导致不能产生感染性病毒粒子BV,然而却并不影响病毒DNA的复制。在ha72的缺失Bacmid转染的细胞中通过透射电镜切片观察完整的核衣壳病毒粒子,但未包装进多角体中,揭示HA72 参与ODV的包埋。通过点突变的手段发现,IPLKL模体中第22位氨基酸K对于HA72正确发挥功能起到至关重要的作用。突变体K22E导致感染性BV粒子产量显著下降和ODV包埋受阻。

   另外研究人员通过免疫荧光共定位和酵母双杂交证实HA72和P33(巯基氧化酶)存在相互作用,这进一步提示HA72除对感染性BV产生和ODV包埋发挥作用外,还可能通过与P33相互作用参与到氧化还原反应,同时K22突变为相反电荷也导致了其与P33的相互作用消失。

  基于功能分类,杆状病毒的基因可分为涉及病毒DNA的复制、转录、包装与集会、同宿主蛋白相互作用、口服感染五种。而杆状病毒作为细胞核内复制的大DNA病毒,其转录、病毒DNA复制,以及核衣壳组装等过程均发生在核内病毒发生基质(VS)。

  这一研究结果结果为深入理解杆状病毒生活史重要事件,尤其是病毒粒子在组装包埋过程提供了重要理论基础。同时,HA72同P33相互作用的发现首次为深入揭示病毒特有氧化还原通路提供思路。

原文摘要:

Baculovirus core gene ha72 is essential for BV production and ODV occlusion and amino acid K22 plays an important role in its function

Ha72 of Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus (a homologue of ac78) was identified as a conserved late baculovirus gene and characterized. HA72 localizes in the intranuclear ring zone. By generating mutants, we showed that HA72 is essential for BV production and ODV occlusion. HA72 also interacted with P33, a baculoviral sulfhydryl oxidase. A point mutation of amino acid 22 from lysine to glutamic acid curtailed BV production and precluded ODV occlusion as well as interaction with P33.

 

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