在冷冻电镜(cryo - EM)研究中,膜结构定量分析耗时且缺乏有效工具。研究人员开展 “CryoVIA: An image analysis toolkit for the quantification of membrane structures from cryo - EM micrographs” 主题研究,开发 CryoVIA 软件,能高效分析膜结构,为研究蛋白 - 膜相互作用等提供新途径。
在生命科学的微观研究领域,冷冻电镜(cryo - EM)是探索蛋白质与膜相互作用的有力武器,它能在接近天然的条件下,为我们呈现生物膜和大分子的高分辨率图像。然而,目前对膜结构的定量分析却困难重重。一方面,当涉及大量数据时,人工分析不仅耗时费力,而且主观性强;另一方面,现有的图像处理工具难以满足需求,从众多显微照片中对膜结构进行定量分析,仍是一项主要依靠人工完成的艰巨任务。为了打破这一困境,来自德国 Forschungszentrum Jülich 的 Ernst - Ruska Centre for Microscopy and Spectroscopy with Electrons 和 Heinrich Heine University 的研究人员 Philipp Scho¨nnenbeck、Benedikt Junglas 和 Carsten Sachse 开展了一项重要研究,相关成果发表在《Structure》杂志上。
研究人员开发了一款名为冷冻囊泡图像分析仪(CryoVIA)的自动化图像处理软件,旨在实现对冷冻电镜图像中脂质结构的大规模数据分析。为了实现这一目标,研究人员采用了多种关键技术方法。在图像分割方面,运用预训练的 U - net 神经网络,对给定的显微照片进行处理,定位感兴趣的膜结构;对于膜结构识别,通过将分割结果拆分为独立的连通组件来确定膜实体,对于重叠的膜结构则采用特殊算法进行分离;在结构分析阶段,计算每个膜轮廓的局部和全局结构参数,如曲率、双层厚度等,并利用卷积神经网络对膜形状进行分类。
CryoVIA 的主要工作流程:CryoVIA 的工作流程主要分为三个部分。首先是基于神经网络的分割,通过预训练的 U - net 对显微照片进行分割,标记出膜结构。接着是膜结构识别,将分割结果转化为独立的膜实体,对于重叠的膜结构,通过监测局部膜结构的连续性进行分离和重新连接。最后是结构分析,对识别出的膜结构进行详细的定量分析,提取局部和全局结构参数,并进行形状分类。