火龙果（Selenicereus costaricensis）原生质体分离新突破：多组织来源探索与高效提取技术优化

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《Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC)》：Protoplast isolation from different explant sources in pitahaya (Selenicereus costaricensis, Cactaceae): insights from roots, callus, and shoot tissues

【字体：大中小】 时间：2025年04月02日 来源：Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC) 2.3

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　　为解决肉质植物包括仙人掌类原生质体分离高效方案有限的问题，研究人员开展了火龙果（Selenicereus costaricensis）不同组织原生质体分离研究。发现愈伤组织产原生质体最多（2.5×10⁶个 /g 鲜重），还优化了分离方案，对肉质植物原生质体研究有重要意义。

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　　在肉质植物（包括仙人掌）中，原生质体分离的高效方案有限。本研究开发了从火龙果（Selenicereus costaricensis）不同组织（体外芽和根、温室芽以及愈伤组织培养物）分离原生质体的方案。分析了组织来源对原生质体产量的影响，并通过评估酶溶液组成及其 pH 值、细胞壁消化时间、振荡速度和纯化过程中蔗糖浓度等因素优化了方案。愈伤组织培养物产生的原生质体数量最多（2.5×10⁶个 /g 鲜重），其次是温室植株的芽（1.6×10⁶

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个 /g 鲜重），而体外根产生的最少（<4×10⁴个 /g 鲜重）。在含有体外和温室芽受损原生质体的纯化溶液中观察到草酸钙晶体（主要是针晶），这可能对原生质体完整性有不利影响。相反，在体外根和愈伤组织培养物的原生质体制备物中未观察到晶体或粘液细胞，有利于完整原生质体的回收。从体外根和芽分离的原生质体无法有效纯化。值得注意的是，仅用食品级果胶酶消化温室芽可产生相对较高的原生质体产量。

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