《Chemical and Biological Technologies in Agriculture》:Deciphering the microbiome potential and metabolic profiling of animal waste co-composting reveals the co-occurrence network of non-microbial and microbial biostimulants to strengthen conservative practices in sustainable agriculture
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当前农业面临诸多挑战,如土地退化、化肥污染等。研究人员针对传统液体肥料 Kunapajala(KPJ)展开研究,分析其微生物组和代谢组。结果发现 KPJ 含多种植物营养成分及促生菌,能促进植物生长。该研究为可持续农业提供新思路。
研究背景
在全球范围内,农业与粮食和营养安全紧密相连,是解决世界饥饿和营养不良问题的关键。然而,当下全球农业却陷入了困境。一方面,为追求快速的粮食生产,土地利用不合理,过度使用合成化肥,不仅导致土地退化,还造成了严重的环境污染。另一方面,农业废弃物大量产生,如合成农药残留等,这些废弃物的不当处理,进一步破坏了生态平衡,影响了自然养分循环和生态系统服务。在这样的背景下,可持续农业应运而生,它旨在保护环境的同时,提高作物产量和质量。而农业废弃物的安全回收利用,成为了可持续农业发展的重要一环。
印度作为农业大国,拥有丰富的传统农业知识。Kunapajala(KPJ)就是一种古老的微生物技术,它能将动物废弃物转化为植物生物刺激剂。此前研究虽已发现 KPJ 含有促进植物生长的细菌,在多种作物上也有应用效果,但对于其微生物组和代谢组的详细特征,以及在可持续农业中的潜在价值,仍缺乏深入研究。为了填补这一空白,来自印度多个研究机构的研究人员开展了此项研究,旨在揭示 KPJ 的微生物组 - 代谢物潜力,为可持续农业提供新的策略和方法。该研究成果发表在《Chemical and Biological Technologies in Agriculture》上。
研究方法
研究人员分别以鱼废弃物(FKPJ)和牲畜废弃物(LKPJ)为原料制备 KPJ。在制备过程中,从消化容器中每隔 15 天收集一次样本,直至孵化第 90 天。通过多种技术对样本进行分析:运用标准实验室方法测定 pH、电导率(EC)等理化性质;采用高通量测序技术对样本进行全基因组宏基因组(WGMG)测序,分析微生物群落结构和功能;利用液相色谱 - 四极杆飞行时间质谱(LC-QTOF-MS)技术筛选代谢物;开展红苋菜盆栽实验,验证 KPJ 对植物生长的促进作用。
研究结果
FKPJ 和 LKPJ 的生态位特性随孵化期变化 :在孵化过程中,FKPJ 和 LKPJ 的 pH 逐渐从酸性变为近中性,EC 先升高后降低,有机碳含量变化则因废弃物成分不同而有所差异。植物可利用的大量营养素(如N H 4 ? ? N 、P 2 ? O 5 ? ? P 和K 2 ? O ? K )含量随孵化期呈现动态变化,且不同营养素的变化趋势各异。此外,植物激素(如吲哚和赤霉素 GA)、酚类和黄酮类等功能化合物的浓度也在不断变化。通过发芽指数(GI)测定发现,KPJ 对水稻种子无毒性,且在多个时间点能促进种子萌发和幼苗生长。
分解期对 FKPJ 和 LKPJ 微生物结构和组成的影响 :通过 WGMG Nanopore 测序分析,发现微生物多样性在分解过程中总体呈增加趋势,且在 30 天样本中,LKPJ 的 α - 多样性最高。β - 多样性分析表明,不同样本的微生物群落存在差异。在微生物群落组成方面,细菌是 KPJ 中的优势菌群,在门水平上,Firmicutes、Bacteroidetes、Proteobacteria 等 5 个主要门普遍存在,且相对丰度随分解期变化;在属水平上,不同孵化期的优势属也有所不同。同时,研究还发现 KPJ 中存在大量植物生长促进根际细菌(PGPR),在 30 天样本中相对丰度最高。此外,研究人员还鉴定出了与有机物质分解、养分循环、植物保护等生态功能相关的微生物类群,同时也对 KPJ 中潜在病原体和抗生素抗性基因(ARG)进行了分析,发现 30 - 60 天产品中的病原体负荷较低。
微生物共现网络分析 :构建微生物共现网络发现,FKPJ 和 LKPJ 的网络结构存在差异,且确定了各自的关键属。相关性分析表明,EC、有机碳和 pH 等理化性质对微生物群落结构和多样性有重要影响,进而调节微生物的植物有益功能。
功能注释和代谢途径分析 :利用 KEGG 通路数据库预测 KPJ 微生物群落的代谢功能,发现主要功能与代谢相关,其中氨基酸和碳水化合物代谢占比较大,且 FKPJ 和 LKPJ 的代谢活动模式相似。
LC-QTOF-MS 代谢物谱分析揭示 KPJ 在可持续农业中的作用 :通过 LC-QTOF-MS 代谢组学分析,在 FKPJ 和 LKPJ 中分别鉴定出 117 和 109 种独特代谢物,主要属于脂质和类脂分子、有机杂环化合物等超类,还发现了具有抗菌、杀虫和除草特性的分子。
盆栽实验验证 FKPJ 和 LKPJ 的植物生物刺激剂潜力 :在红苋菜盆栽实验中,添加 FKPJ 和 LKPJ 的处理组在植物生长和产量相关指标上表现良好,部分指标甚至优于 50% 推荐施氮量(RDN)的处理组,表明 KPJ 在一定程度上可替代合成肥料。
研究结论与讨论
本研究首次全面分析了 KPJ 的微生物组和代谢组,为优化农业生态系统中的微生物群落提供了新策略。研究表明,KPJ 能将动物废弃物转化为植物营养物质、植物激素和其他生物活性化合物,符合循环生物经济模式,有助于提高资源回收率和成本效益。同时,KPJ 中的微生物群落与土壤微生物群落相似,可能作为微生物组工程的重塑剂,促进植物生长和养分循环。此外,KPJ 在病原体和 ARG 传播方面风险较低,且含有与人类肠道微生物组相关的关键驱动因素,有望通过改善土壤生物学,促进人类健康。然而,要进一步推广基于有机改良剂的自然微生物组维护,还需要更严格的评估。本研究为可持续农业发展提供了重要理论依据和实践指导,为传统农业知识在现代可持续农业中的应用开辟了新道路。
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